ssRNA Cyclase 是一种耐热连接酶,环状 RNA 合成试剂盒可催化单链DNA(ssDNA)和单链RNA(ssRNA)底物的离子分子连接(即环化)。环化反应中,要求催化底物单链 DNA/RNA 具有5’-磷酸基团和3’-OH基团。
ssRNA Cyclase 能生产用于滚动圈复制或滚动圈转录实验和下一代测序的单链DNA模板以及生产15~500nt环状RNA。
1、吉赛GSPure®Circular RNA Synthesis Kit试剂盒制备环状RNA测试
图1. 使用吉赛GSPure®Circular RNA Synthesis Kit试剂盒制备环状RNA的效果图。反应体系为20 µL,长度为307 nt的单链RNA的终浓度为1 μM,反应条件为45℃孵育60 min,随后取样用6%尿素变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,最终经SYBRTM Gold 核酸染料孵育后荧光成像分析。如图所示,本试剂盒在60 min内就可以将85% 以上的5’磷酸化3’羟基的单链RNA转化为环状RNA。