产品简介
T7共转录加帽RNA合成试剂盒使用T7 RNA聚合酶(T7 RNA Polymerase)进行体外转录,以含有T7启动子序列的线性双链DNA为模板、NTPs为底物对启动子下游DNA序列进行转录,加帽试剂以共转录方式被掺入mRNA的5'端,使客户能够简单快速地获得大量带有Cap1的RNA产物。Cap1的添加可以保护mRNA免于降解,从而确保mRNA的翻译效率。本试剂盒内含常用的修饰核苷供转录需求选择使用。修饰核苷酸可以有效降低mRNA的免疫原性,抑制先天免疫激活,使mRNA可能成为再生医学、疾病治疗和细胞重编程的有力工具。
本试剂盒一个反应能够转录获得150~200 μg的RNA产物,并可放大生产毫克级别的RNA。
应用场景
转录合成的RNA可用于RNA结构和功能研究、RNase保护、探针杂交、anti-sense RNA和 RNAi等应用。
运输与保存方法
≤0℃运输;-25℃~-15℃保存。
1、转录产物产量低或转录失败
①可能是模板自身原因,建议重新纯化或线性化模板;②重新确认模板定量及完整性;③加大模板投入量;
2、产物电泳拖尾现象
①实验操作过程被RNase污染;②DNA模板被RNase污染;
3、RNA产物片段与预期不符
①质粒模板没有完全线性化;②RNA存在未完全变性的二级结构,建议使用变性胶检测RNA 产物;③模板GC含量高,可能形成高级结构;④RNase污染;⑤模板序列中包含类似T7 RNA 聚合酶终止序列,导致转录提前终止,建议尝试不同的RNA聚合酶。