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  • RNase检测试剂盒(荧光探针法)
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  • 产品简介


    核糖核酸酶(RNases)是普遍存在于环境和许多生物材料中的一类酶。它们可以降解RNA,对许多涉及RNA的研究和生产过程造成影响。


    RNase检测试剂盒基于荧光基团标记的RNA探针,当样本中不含RNase活性时,该探针稳定存在,不会产生荧光信号;当样本中含有RNase活性时,探针被降解,产生逐渐增强的荧光信号;荧光信号增加的速率与酶的数量和活性成正相关。用荧光酶标仪在ex/em=535/575nm波长下测定荧光信号增加倍数,判断样本是否被RNase污染。


     

    储存运输条件及有效期


    1)-25~-15℃运输;

    2)试剂盒不同组分按如下温度分别储存:

    名称                                                 储存温度

    10×反应液                                       -25~-15℃

    RNA探针                                         -25~-15℃

    TE缓冲液                                        -25~-15℃

    RNase A标准品 (10mg/mL)           -25~-15℃

    标准品稀释液                                 -25~-15℃

    RNase水                                     -25~30℃  

    RNase清除剂                                  2~30℃       

    3)未开封试剂盒储存 12个月;开封后试剂盒储存6个月,RNA探针溶液建议根据单次使用量进行分装,避光储存,避免反复冻融。

     


    产品特点


    灵敏度高:检出限低至RNase A:0.313pg/mL,约1.56×10-9 U/μL,仅为进口同种试剂盒的1/8。

    精密度高:批内CV≤10%,批间CV≤15% 。

    稳定性好:低温避光,可长期稳定储存。


  • Q1:RNase检测试剂盒的反应温度和时间是怎样的?

    请将反应体系置于37℃恒温条件下进行实验,反应时间为30分钟。

     

    Q2:什么情况下可能出现假阳性或假阴性结果或定量结果不准确?

    a.存在可能干扰荧光基团发光的物质,可能导致假阴性结果;

    b.如果待测样本溶液中含有抑制RNA酶活性的物质,可能导致假阴性结果;

    c.引起RNA探针化学性质不稳定性的溶液,可能导致假阳性或假阴性结果。

     

    Q3:制备标准品溶液时,前面的步骤为什么要用标准品稀释液稀释而不是用无RNase水稀释?

    因为标准品在标准品稀释液中比较稳定,即使多次稀释也不会改变它本身的活性。如果用水稀释,多步操作可能会造成标准品的活性改变,标准曲线产生偏差。

     

    Q4:如何调节合适的酶标仪增益值?

    如您的酶标仪有自动增益选项,则选用自动增益。如您的酶标仪没有自动增益选项,则根据增益值范围先设置中间值,然后根据反应后阳性对照孔(79μL无RNase水+1μL RNase A标准品)的荧光值来调节合适的增益值:如超过仪器上限,则适当降低增益值,如远低于仪器上限,则适当调高增益值。

     

    Q5:为什么严重污染的样本可能会出现假阴性的结果?

    判定RNase污染的标准是:RFU30(待测样本)≥2×RFU0(待测样本),即反应30分钟时的RFU值达到0分钟的RFU值的2倍以上。如果样本被严重污染,则有可能反应开始时速度很快,在非常短的时间测到一个很高的RFU0值,出现RFU30(待测样本)<2×RFU0(待测样本)的假阴性结果。此时需要用无RNase水来稀释待测样本。

     

    Q6:阴性对照RFU值不为0,就说明阴性对照被污染了吗?

    不一定。阴性对照通常也能够测到较低的RFU值,但不会随着反应时间的延长而RFU值显著增加,一般认为30分钟的RFU30小于0分钟的RFU0的2倍就说明阴性对照没有被污染。


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产品信息
产品名称 产品货号 规格 数量 价格(元)
GENESEED® RNase assay Kit(Fluorescence) H0601 48 Tests 4000
GENESEED® RNase assay Kit(Fluorescence) H0602 192 Tests 6300